Bilaga 3 (CNS)
Från Referensmetodik för laboratoriediagnostik
(Omdirigerad från Direkt immunfluorescens)
Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet
Bilaga 3
Detektion av bakterier i direktutstryk: Direkt immunfluorescens
Reagens
oftast lokalt tillverkade.
Fixering av utstryk
- Lufttorka utstryket på en plan yta,
- Fixera över låga.
- Placera alternativt några droppar metanol på objektglaset. Låt ligga 2 min. Låt kvarvarande metanol rinna av utan att skölja och låt utstryket lufttorka igen.
Färgningsprocedur
- Lägg en droppe av konjugatet på det fixerade utstryket.
- Lägg därefter detta i fuktig kammare.
- Inkubera 20 min i 37 °C.
- Skölj objektglaset ymnigt i PBS.
- Ställ objektglaset i kyvett med destvatten i 5 min.
- Ta upp objektglaset och torka försiktigt med filtrerpapper runt preparatet.
- Lägg på ett täckglas med buffrad glycerol: 1 del PBS pH 7,4 + 9 delar glycerol 87 % p.a.
- Undersök i fluorescensmikroskop, 40 x 10 förstoring.
